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蛋白质n端和C端测定

N端,1.氨肽酶法,2.用二硝基氟苯(DNFB),3.用丹黄酰氯(PITC) C端,1.肼解法,2.还原法(用氢化锂铝,硼氢化钾)3.羧肽酶法(1.羧肽酶A:除Arg,Lys,Pro外都可以,2.羧肽酶B,仅Arg,Lys可以)

n端测序的原理 蛋白质和多肽n-端测序技术是以edman化学降解法为基础的,edman化学降解,其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂与蛋白质和多肽的n-端残基的偶联,苯氨基硫甲酰酞(ptc-肽)环化裂解,和噻唑呤酮苯氨(atz)转化为苯异硫

常用于蛋白质多肽链n端.c端测定的方法有几种(1)n-末端测定 a.二硝基氟苯法(fdnb,dnfb):1945年sanger提出此方法,是他的重要贡献之一. dnp-氨基酸用有机溶剂抽提后,通过层析位置可鉴定它是何种氨基酸.sanger用此方法测定了胰岛素的n?末端分别为甘氨酸及苯丙氨酸. b.氰酸盐法:1963年stank及smyth介绍了一种测定n?末端的新方法,步骤如下: 由于乙内酰脲氨基酸不带电荷,因此可用离子交换层析法

蛋白质生物合成过程中的氨基酸排列走向.N端是“氮”,是NH2,读氨基;C端是“碳”,是COOH,读羧(suo,一声)基.是Dintzis等人用3H-亮氨酸作标记分析了兔网织红细胞无细胞体系中血红蛋白生物合成的过程来证明的.血红蛋

大学生物学书上有证明的.见生物化学(下册)王镜岩主编第528页.是dintzis等人用3h-亮氨酸作标记分析了兔网织红细胞无细胞体系中血红蛋白生物合成的过程来证明的.血红蛋白中含有较多亮氨酸.其氨基酸序列为已知.合成反应在较低温度(15度)中进行,以降低合成速度.在反应开始后的4-60分钟内,每隔一定时间取样分析.将带有标记的蛋白质分离出来,用胰蛋白酶水解肽链,用纸层析法分离水解碎片并测定所含放射性强度.从实验结果中发现,反应4分钟后,只有竣基端含有3h-亮氨酸.随着反应时间的延长,带有标记的肽段自羧基向n端延伸,到60min时,几乎整个肽断都布满了标记物.这个实验说明多肽链的合成是从n端向c端进行的

翻译的起始部位总是在mRNA的5'端,终止密码总是在mRNA的3'端,因此翻译有方向性,蛋白质合成总是从N末端开始,到C末端止.DNA和mRNA逆向,所以,应改为:蛋白质的N端与C端与DNA的3'端和5'端对应

大学生物学书上有证明的.见生物化学(下册)王镜岩主编第528页.是Dintzis等人用3H-亮氨酸作标记分析了兔网织红细胞无细胞体系中血红蛋白生物合成的过程来证明的.血红蛋白中含有较多亮氨酸.其氨基酸序列为已知.合成反应在较低温度(15度)中进行,以降低合成速度.在反应开始后的4-60分钟内,每隔一定时间取样分析.将带有标记的蛋白质分离出来,用胰蛋白酶水解肽链,用纸层析法分离水解碎片并测定所含放射性强度.从实验结果中发现,反应4分钟后,只有竣基端含有3H-亮氨酸.随着反应时间的延长,带有标记的肽段自羧基向N端延伸,到60min时,几乎整个肽断都布满了标记物.这个实验说明多肽链的合成是从N端向C端进行的

蛋白质含量测定方法比较 本实验的目的是学会各种蛋白质含量的测定方法.了解各种测定方法的基本原理和优缺点. 蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一.目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法,双缩尿法

蛋白质生物合成过程中的氨基酸排列走向.N端是“氮”,是NH2,读氨基;C端是“碳”,是COOH,读羧(suo,一声)基.是Dintzis等人用3H-亮氨酸作标记分析了兔网织红细胞无细胞体系中血红蛋白生物合成的过程来证明的.血红蛋

现有的肽和蛋白质测序方法包括N末端序列测定的化学方法Edman法、C末端酶解方法、C末端化学降解法等

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